抗菌紡織品的最重要的性能指標是抗菌性。測試抗菌性時,要求培養基濃度、溫濕度、pH值及試驗時間與穿衣條件相一致,實驗儀器應為微生物實驗常用儀器,且對任何形狀的紡織材料都能測試[1]。抗菌性的測試方法中,發展較早的是日本和美國,最有代表性且應用較廣的是美國的AATCC試驗法100和日本的工業標準。國內使用較多的評價方法一般都是參照AATCC(American Association of Textile Chemists and Colorists,美國紡織染色家和化學家協會)標準[2]和日本JAFET(日本纖維製品新功能協議會)批準的"SEK"標誌認證標準的方法[3]。我國於1992年頒布了紡織行業標準FZ/T01021-1992《織物抗菌性能試驗方法》[4],1996年頒布了國家標準GB15979-2002《一次性使用衛生用品衛生標準》[5]。但是抗菌性能評價的方法和標準還遠末作到係統、統一、規範,尤其是抗菌紡織品的性能評價和產品規範在我國還有許多問題不明確,隻能做到簡單的定性檢測。 jianyudangqianwoguoduikangjunfangzhipindequanmianpingjiahaibunengshiyingguoneishengchanheduiwaimaoyidexuyao,benwenduimuqianshijieshangshiyongjiaoduodekangjunceshifangfajibiaozhunjinxingleduibi,
1 測試菌種的選擇 微生物(microorganism)是存在於自然界的一群體形細小、結構簡單、rouyanwufazhijiekandao,bixujiezhuxianweijingdengshebeicainengguanchadaodeweixiaoshengwu。juedaduoshudeweishengwuduirenleihedongzhiwushiwuhaide,shenzhishiyouyihebixude。danshiyeyouxiaobufendeweishengwukeyiyinqirenleihedongzhiwudebinghai[6]。因而人們在進行抗菌性能的評價中,菌種的選擇必須具有科學性和代表性。表1列出的菌種是在自然界和人體皮膚及粘膜上分布最為廣泛的。 測試的菌種[7]包括細菌和真菌。在細菌中主要用革蘭氏陽性菌(金黃色葡葡球菌、巨大芽胞杆菌、枯草杆菌)和革蘭氏陰性菌(大腸杆菌、熒光假單胞杆菌);在真菌中主要用黴菌(黑曲黴、黃曲黴、變色曲黴、桔青黴、綠色木黴、球毛殼黴、宛氏擬青黴、臘葉芽枝黴)和癬菌(石膏樣毛癬菌、紅色癬菌、紫色癬菌、鐵鏽色小抱子菌、袍子絲菌、白色念珠菌)。 金黃色葡萄球菌是無芽胞細菌中抵抗力最強的致病菌,可作為革蘭氏陽性菌的代表。巨大芽胞杆菌是芽胞類細菌中常見的致病菌;枯(ku)草(cao)杆(gan)菌(jun)易(yi)形(xing)成(cheng)芽(ya)胞(bao),抵(di)抗(kang)力(li)強(qiang),可(ke)作(zuo)為(wei)芽(ya)胞(bao)菌(jun)的(de)代(dai)表(biao)。大(da)腸(chang)杆(gan)菌(jun)分(fen)布(bu)相(xiang)當(dang)廣(guang)泛(fan),巳(si)作(zuo)為(wei)通(tong)常(chang)的(de)革(ge)蘭(lan)氏(shi)陰(yin)性(xing)菌(jun)的(de)代(dai)表(biao)性(xing)菌(jun)種(zhong)用(yong)於(yu)各(ge)種(zhong)試(shi)驗(yan)。黃(huang)曲(qu)黴(mei)、球毛殼黴作為規定的防黴試驗用菌種,已列入我國國家標準(GB2423.16-81),qitayixiesuoxuanzedemeijun,zeshiqinshifangzhipinhuogaofenzicailiaodechangjianmeijun。baisenianzhujunshirentipifuzhanmochangjiandetiaojianzhibingxingzhenjun,duiyaowujuyouminganxing,juzhenjundetexing,junluokusixijunerbushixijunyoubutongyumeijun,yinjuyoukusixijundejunluo,yiyujishuguancha,changzuoweizhenjundedaibiao。 yinci,weikaohekangjunfangzhipinshifoujuyouguangpukangjunxiaoguo,jiaohelidexuanzeshianyidingdebili,jiangyoudaibiaoxingdejunzhongpeichenghunhejunzhongyongyujiance。muqiandabufenkangjunchanpindekangjunxingneng,wangwangjinxuanzejinhuangseputaoqiujun、大腸杆菌和白色念珠菌分別作為革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌和真菌的代表。但實際上僅用這二種菌來代表織物的抗菌性能是遠遠不夠的。 另(ling)外(wai),由(you)於(yu)大(da)部(bu)分(fen)真(zhen)菌(jun)無(wu)法(fa)計(ji)數(shu)菌(jun)落(luo)數(shu),因(yin)此(ci),紡(fang)織(zhi)品(pin)抗(kang)真(zhen)菌(jun)性(xing)能(neng)的(de)評(ping)價(jia)主(zhu)要(yao)通(tong)過(guo)觀(guan)察(cha)試(shi)樣(yang)接(jie)觸(chu)真(zhen)菌(jun)後(hou),在(zai)一(yi)定(ding)的(de)溫(wen)濕(shi)度(du)的(de)條(tiao)件(jian)下(xia),經(jing)過(guo)一(yi)定(ding)時(shi)間(jian)以(yi)後(hou)真(zhen)菌(jun)在(zai)試(shi)樣(yang)上(shang)的(de)生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)來(lai)評(ping)定(ding)的(de),而(er)對(dui)真(zhen)菌(jun)生(sheng)長(chang)程(cheng)度(du)的(de)評(ping)定(ding),剛(gang)采(cai)用(yong)英(ying)國(guo)標(biao)準(zhun)BS6085-81來進行等級評定[8]。
2 紡織品抗菌性能測試方法分類 紡織品抗菌性能的測試分為定量測試方法和定性測試方法,以定量測試方法最為重要。
2·1 定量測試方法 目前紡織品抗菌性能定量測試方法及標準包括美國AATCC Test Method lO0(菌數測定法)TZ/TO2021-9、奎因(Quinn)實驗法等。 定量測試方法包括織物的消毒、接種測試菌、菌培養、對殘留的菌落計數等。它適用於非溶出性抗菌整理織物,不適用於溶出性抗菌整理織物,該法的優點是定量、準確、客觀,缺點是時間長、費用高。圖1是菌數測定法測試結果的例子[9]。
2·2 定性測試方法 定性測試方法主要有美國AATCC Test Method 9O(Halo Test,暈圈法,也叫瓊脂平皿法)、AATCC Test Method 124(平行劃線法)和JISZ2911-1981(抗微生物性實驗法)等。 定ding性xing測ce試shi方fang法fa包bao括kuo在zai織zhi物wu上shang接jie種zhong測ce試shi菌jun和he用yong肉rou眼yan觀guan察cha織zhi物wu上shang微wei生sheng物wu生sheng長chang情qing況kuang。它ta是shi基ji於yu離li開kai纖xian維wei進jin入ru培pei養yang皿min的de抗kang菌jun劑ji活huo性xing,一yi般ban適shi於yu溶rong出chu性xing抗kang菌jun整zheng理li,但dan不bu適shi用yong於yu耐nai洗xi滌di的de抗kang菌jun整zheng理li。優you點dian是shi費fei用yong低di,速su度du快kuai,缺que點dian是shi不bu能neng定ding量liang測ce定ding抗kang菌jun活huo性xing,結jie果guo不bu準zhun確que。圖tu2是暈圈法測試結果的例子[9]。
3 抗菌性能評價方法的選擇 有關紡織品抗菌性能評價方法的研究,國外已開展了多年,並陸續建立了一些具有代表性的、相對穩定的、可在多個實驗室重複進行的測定方法。具體見表l和表2。 這(zhe)些(xie)方(fang)法(fa)中(zhong)大(da)多(duo)數(shu)都(dou)存(cun)在(zai)一(yi)定(ding)的(de)局(ju)限(xian)性(xing),各(ge)種(zhong)方(fang)法(fa)的(de)測(ce)定(ding)結(jie)果(guo)之(zhi)間(jian)沒(mei)有(you)嚴(yan)格(ge)的(de)可(ke)比(bi)性(xing)。而(er)且(qie)各(ge)自(zi)的(de)優(you)缺(que)點(dian)十(shi)分(fen)明(ming)顯(xian),以(yi)下(xia)是(shi)對(dui)幾(ji)種(zhong)常(chang)用(yong)抗(kang)茵(yin)測(ce)試(shi)方(fang)法(fa)的(de)介(jie)紹(shao):
3·l AATCC-90試驗法 又稱暈圈試驗法,是用於抗菌劑篩選的抗菌效力快速定性方法,原理是:在瓊脂培養基上接種試驗菌,再緊貼試樣,於37℃下培養24h後(hou),用(yong)放(fang)大(da)鏡(jing)觀(guan)察(cha)菌(jun)類(lei)繁(fan)殖(zhi)情(qing)況(kuang)和(he)試(shi)樣(yang)周(zhou)圍(wei)無(wu)菌(jun)區(qu)的(de)暈(yun)圈(quan)大(da)小(xiao),與(yu)對(dui)照(zhao)樣(yang)的(de)試(shi)驗(yan)情(qing)況(kuang)比(bi)較(jiao)。此(ci)法(fa)一(yi)次(ci)能(neng)處(chu)理(li)大(da)量(liang)的(de)試(shi)樣(yang),操(cao)作(zuo)較(jiao)簡(jian)單(dan),時(shi)間(jian)短(duan)。但(dan)也(ye)存(cun)在(zai)一(yi)些(xie)問(wen)題(ti),如(ru)雖(sui)然(ran)規(gui)定(ding)了(le)在(zai)一(yi)定(ding)時(shi)間(jian)內(nei)培(pei)養(yang)試(shi)驗(yan)菌(jun)液(ye),但(dan)是(shi)菌(jun)濃(nong)表(biao)l 抗細菌效力測定方法[10] 表2 抗黴菌效力測定方法[10] 卻que沒mei有you明ming確que的de規gui定ding。另ling外wai,阻zu止zhi帶dai的de寬kuan度du代dai表biao的de是shi擴kuo散san性xing和he抗kang菌jun效xiao力li,對dui於yu與yu標biao準zhun織zhi物wu比bi較jiao是shi有you意yi義yi的de,但dan不bu能neng作zuo為wei抗kang菌jun活huo力li的de定ding量liang評ping定ding[11]。 AATCC-90試驗法改良之一(噴霧法)是在培養後的試樣噴灑一定量TNT試劑,肉眼觀察試樣上菌的生長情況。其發色原理為TNT試(shi)劑(ji)因(yin)試(shi)驗(yan)菌(jun)的(de)琥(hu)珀(po)酸(suan)脫(tuo)氫(qing)酶(mei)的(de)作(zuo)用(yong)被(bei)還(hai)原(yuan),生(sheng)成(cheng)不(bu)溶(rong)紅(hong)色(se)色(se)素(su)而(er)顯(xian)紅(hong)色(se),從(cong)而(er)達(da)到(dao)判(pan)定(ding)抗(kang)菌(jun)性(xing)的(de)目(mu)的(de)。該(gai)種(zhong)方(fang)法(fa)的(de)優(you)點(dian)就(jiu)是(shi)無(wu)論(lun)試(shi)樣(yang)是(shi)否(fou)有(you)抑(yi)菌(jun)圈(quan)形(xing)成(cheng),隻(zhi)要(yao)平(ping)板(ban)上(shang)有(you)細(xi)菌(jun)生(sheng)長(chang),就(jiu)會(hui)顯(xian)出(chu)紅(hong)色(se)[12]。 AATCC-90試驗法改良之二(比色法)是在培養後試樣上的菌洗出液中加入一定量的TNT試劑使發色,l5min後用分光光度計測定525nm處的吸光度,來求出活菌個數。但是以上兩方法不適用於無琥珀酸脫氫酶的試驗菌。
3·2 AATCC-l00試驗法 AATCC-l00是一種容量定量分析方法,適用於抗菌紡織品抗菌率的評價。 該法於1961年由AATCC委員會提出,1965,1981,1988,1993年作了修訂。是目前國外使用較廣泛的抗菌性測試法之一。 該法原理為:在zai待dai測ce試shi樣yang和he對dui照zhao試shi樣yang上shang接jie種zhong測ce試shi菌jun,分fen別bie加jia入ru一yi定ding量liang中zhong和he液ye,強qiang烈lie振zhen蕩dang將jiang菌jun洗xi出chu,以yi稀xi釋shi平ping板ban法fa測ce洗xi脫tuo液ye中zhong的de菌jun濃nong,與yu對dui照zhao樣yang相xiang比bi計ji算suan織zhi物wu上shang細xi菌jun減jian少shao的de百bai分fen率lv。此ci法fa的de缺que點dian是shi一yi次ci試shi驗yan的de檢jian體ti不bu能neng太tai多duo,且qie花hua費fei時shi間jian較jiao長chang;對於非溶出型試樣,不能進行抗菌性能評價;沒有詳細規定中和溶液的成份;而且菌液中營養過於豐富,與實際穿著條件相差太大;容器太大,不易操作[13]。 在(zai)吸(xi)收(shou)國(guo)內(nei)外(wai)經(jing)驗(yan)的(de)基(ji)礎(chu)上(shang),經(jing)過(guo)大(da)量(liang)的(de)實(shi)驗(yan),對(dui)其(qi)加(jia)以(yi)改(gai)進(jin),形(xing)成(cheng)了(le)一(yi)套(tao)係(xi)統(tong)的(de)定(ding)量(liang)測(ce)試(shi)方(fang)法(fa)體(ti)係(xi),可(ke)以(yi)滿(man)足(zu)不(bu)同(tong)抗(kang)菌(jun)紡(fang)織(zhi)品(pin)抗(kang)菌(jun)性(xing)能(neng)測(ce)試(shi)的(de)需(xu)要(yao)。即(ji)改(gai)良(liang)AATCC-l00,要點如下: 將AATCC-l00法的試樣由直徑為4.8cm的圓形 改為邊長約1.8cm的正方形,將其放入3OmL或50mL帶蓋錐形瓶。用0.85%冰冷生理鹽水(0-4℃)代替AATCC肉湯稀釋接種菌。將菌種從約l08-1O9cfu/mL稀釋到l×lO5-2×lO5cfu/mL,製成接種菌液。用20mL,0.85%冰冷生理鹽水代替中和劑洗滌試樣[14]。 用下式計算試樣的抑菌活性和殺菌活性: l8h後空白對照樣活菌數―l8h後試樣活菌數 抑菌率 = --------------------------------------- ×100% l8h後空白對照樣活菌數
‘0’時空白對照樣活菌數一l8h後試樣活菌數 殺菌率 = --------------------------------------- ×100% ‘0’時空白對照樣活菌數
該種方法無論對於溶出型試樣,還是非溶出型試樣,都能進行抗菌測試,而且培養基的養分適合織物的使用條件[12]。
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